Колоночная гель-хроматографія
Цей метод базується на лінійній залежності логарифма молекулярної маси багатьох глобулярных білків і обсягу элюирования із заповненою гелем (визначеного розміру пор). Таким чином, для визначення молекулярної маси білка слід лише знайти обсяг його елюції з откалиброванной заздалегідь колонки. Калібрування виконують методом пропускання через колонку білків з заздалегідь відомими масами молекул і заміряючи обсяги елюції кожного з них. Якщо в якості заповнювача використовують сефадекс G-75, то розрахунок молекулярної маси ведуть по знайденому експериментальним шляхом рівнянню:
lg M = 5,624 – 0,752 · (Vэ / Vo),
де М – шукана молекулярна маса; Vэ – виходить з колонки об’єм розчину з досліджуваним речовиною; Vo – обсяг вільної колонки.
Для проведення аналізу знадобляться розчин блакитного декстрану (1%), розчин NaCl (0,1 моль/л), сефадекс G-75 (4 г), розчин гемоглобіну (1%).
