Виконання аналізу
Підготовлену колонку заповнюють гелем сефадекса G-75 та промивають розчином NaCl. Після того як зіллють розчин NaCl, піднімається вище рівня гелю, на його поверхню акуратно поміщають 0,5 мл розчину блакитного декстрану. Потім збирають виходять з колонки рідини в мірний циліндр, де їх зберігають до кінця експерименту. Початківець витікати розчин з блакитний забарвленням збирають по 20 крапель у підготовлені заздалегідь пробірки. Елюатів з них від першого до самого інтенсивно забарвленого зливають в той же мірний циліндр, в якому вже зібрані незабарвлені фракції. Об’єм пробірок ослаблої забарвленням розчину не враховують.
Об’єм рідини, зібраної в мірний циліндр, складається вільним об’ємом колонки (Vo). Далі повторюють заповнення колонки, але замість блакитного декстрину використовують розчин гемоглобіну. Об’єм елюату в мірному циліндрі до виходу розчину з максимально рожевим забарвленням є величиною Vэ. Знайдені значення Vo і Vэ підставляють у відповідне рівняння і обчислюють масу білка. Амінокислотний склад білків знаходять подібними методиками.
