Молекулярна маса білків і методи її визначення

Тонкошарова гель-хроматографія

Принцип цього методу полягає в тому, що в ході просування розчину білків по пластині з найтоншим шаром сефадекса, їх суміш розподіляється нерівномірно. По відстані, пройденого кожним з білків від початкової стартової лінії, знаходять логарифми їх молекулярних мас. Для визначення молекулярної маси білка методом тонкошарової гель-хроматографії будують калібрувальний графік, що відображає залежність пройдених маркерними білками відстаней від логарифмів їх молекулярних мас. Вже по ньому знаходять довжину шляху досліджуваного білка і масу його молекули.

Цікаве:  Глобальне потепління – причина появи гігантських воронок на Ямалі

Для виконання експерименту потрібно столик із змінним кутом нахилу, а також хроматографічну камеру. З реактивів знадобляться сефадекс G-200 або G-150, натрій-фосфатний буфер, рн 7,4 (0,1 моль/л), розчин бромфенолового синього (0,1%), розчин СН3СООН (5%), розчин CH3COONa (2 %), набір маркерних білків, хроматографічний папір.